研究地點:
- 唐山師範學院體育系,河北唐山
摘 要
目的
研究明日葉查爾酮增強過度訓練小鼠的免疫力及抗疲勞的能力。
方法
建立雄性ICR 小鼠8 周跑台的過度訓練模型,將模型小鼠分為4 個免疫大組,每個免疫大組又分為低、中、高三個劑量組、過度訓練組及陽性藥物對照組(n=10),各劑量組以不同劑量的明日葉查爾酮灌胃並分別與過度訓練組和陽性對照組進行比較,評價過度訓練小鼠抗疲勞能力相關指標,並通過體液免疫、細胞免疫、單核-巨噬細胞功能和NK 細胞活性評價其免疫能力。
結果
與過度訓練組比較,查爾酮中、高劑量組的肌、肝糖原顯著升高(P<0.05),血清乳酸脫氫酶、血尿素氮、血清肌酸激酶顯著降低(P<0.05),並與陽性對照組沒有顯著差異;中、高劑量明日葉查爾酮能夠提高NK 細胞活性,促進小鼠抗體形成細胞增殖,促進脾淋巴細胞增殖轉化。
結論
明日葉查爾酮具有較好緩解運動性疲勞、增強免疫力的作用。
關鍵詞:明日葉查爾酮;過度訓練;免疫;抗運動性疲勞
英文摘要
Study on Effect of Ashitaba Chalcone on the Strengthen Immune Function and Anti-motor Fatigue
Abstract: Objective: To investigate the effects of Ashitaba chalcone on the strengthen immune function and anti-motor fatigue.
Methods: 8 weeks treadmill model of overtraining mice model were established. Overtraining mouse were divided into four immune groups. Every group was divided into low dose group, middle group, high group, overtraining group and positive medicine group. Ashitaba chalcone of different contents were gavaged. The ability of anti-fatigue and immunity of overtraining mice were investigated.
Results:Compared with overtraining group, the contents of muscle glycogen and hepatic glycogen obviously increased in middle and high dose group (P<0.05), serum lactate dehydrogenase, creatine kinase and blood urea nitrogen decreased (P<0.05). Ashitaba chalcone of middle and high dose can promote the proliferation of antibody-producing cells, the activity of natural killer, the proliferation of mouse spleen lymphocytes and transformation of mouse spleen lymphocytes.
Conclusion:In conclusion, Ashitaba chalcone has a good effect of anti-motor fatigue activity and enhance immunity.
Keywords: Ashitaba chalcone; overtraining; immunity; anti-motor fatigue
明日葉是一種多年生草本植物。長期以來人們將其作為一種蔬菜食用。明日葉有多種功效,包括抗癌、抗氧化、降血糖、降血脂等。其中主要的功效物質是明日葉中的查爾酮。近年來,明日葉查爾酮的功效研究主要針對其抗腫瘤、降低血糖和血脂方面[1,2]。
運動員作為一個特殊人群,長期的高強度運動訓練和比賽很容易產生運動疲勞[3]。運動性疲勞是人體運動過程中出現的生理現象,是機體的一種氧化應激反應,是一種警報性信號,疲勞將引起運動能力下降, 機體免疫力下降,疲勞的程度也能體現人體機能的生化變化。自從第五屆國際運動生物化學會議(1982)明確提出運動性疲勞的概念,科研人員對增加機體抗氧化能力,增強免疫力,延緩運動性疲勞方面的研究逐漸增多。
如何增強運動員機體免疫力,延緩運動性疲勞的發生一直是運動醫學領域重點關注的問題之一[3,4]。
鑒於明日葉查爾酮具有極強的抗氧化能力,本實驗採用雄性ICR小鼠過度訓練運動模型,研究明日葉查爾酮對過度訓練小鼠增強免疫力、抗疲勞的效果。
1 材料與方法
1.1 材料與試劑
明日葉查爾酮 某高新科技有限公司;紅景天西洋參膠囊 廣州賽健生物科技有限公司;血清睪酮、血清皮質酮測定試劑盒、肌/肝糖原測定試劑盒、綿羊紅細胞(SRBC)、Hank’s 液(pH 7.2-7.4)、RPMI1640培養液、小牛血、Con A、PMS、MTS 南京建成生物工程研究所;Percp -CD3+、FITC-CD4+、PE-CD8+ 美國R&D公司。
1.2 儀器與設備
動物跑台 淮北正華生物儀器設備有限公司;BD FACSCalibur流式細胞儀 美國BD公司;DL-CG2N超淨工作台 北京東聯哈爾儀器公司;HW.SY11-KP3恆溫水浴鍋 北京市長風儀器儀表公司;5418R冷凍高速離心機Ependorff 公司;FRIM可見光分光光度計 法國SECOMAM公司;MCO-15AC CO2培養箱 日本SANYO公司;IX71倒置顯微鏡 日本OLYMPUS公司;HBS-1096酶標儀 上海精密儀器儀表有限公司;FSH-2型勻漿機 江蘇省金壇市環宇科學儀器廠。
1.3 方法
1.3.1 明日葉查爾酮灌胃液的配置
明日葉查爾酮與蒸餾水按照一定比例混合,得到濃度為40mg/mL、80mg/mL、200mg/mL 的灌胃液,備用。
1.3.2 模型制備、分組及運動訓練方案
雄性ICR 小鼠(北京維通利華實驗動物技術有限公司),5 周齡,體重22.8±2.1g。普通飼料餵養1 周後,隨機分為四個免疫大組(免疫組1-4)。每個免疫組各有過度訓練組、陽性對照組和明日葉低、中、高劑量組,每組10 只小鼠,每個免疫組共50 只老鼠。
過度訓練組:以運動模型為依據每天進行相應訓練,每天補充同劑量的蒸餾水。
陽性對照組:以運動模型為依據每天進行相應訓練,並給以紅景天西洋參膠囊。紅景天西洋參膠囊用蒸餾水配製成50mg/mL 的溶液,以說明書推薦用量經折算後的小鼠用量200mg/kg 進行灌胃。每天運動前1 小時進行灌胃,每只小鼠每天灌胃1 次,每次4 mL/kg。
明日葉低、中、高劑量組:以運動模型為依據每天進行相應訓練,並給以明日葉查爾酮溶液。每天運動前1 小時進行灌胃,每只小鼠每天灌胃1 次,每次為4mL/kg。
運動模型:在顧明的運動模型[5]基礎上,結合動物實際行為表現,建立了適合本研究的動物模型。
方案:8 周跑台訓練,跑台的坡度1°。先進行1 周的適應性訓練10 m/min×30 min。之後正式訓練,每周訓練6 天,休息1 天,每次從10 m/min 開始,每5min 速度增加5 m/min,直至45 m/min 結束訓練。觀察並記錄動物的一般情況(毛色、活動、攝食量、死亡率等情況)及訓練情況(跑步速度,動作協調性,精神疲倦情況,是否腹臥位、垂頭,刺激後有無反應),訓練過程中觀察小鼠精神狀態、飲食、睡眠等情況。
1.3.2 指標測定
動物末次運動訓練後,禁食12 小時,小鼠眼球取血,血液離心得血清,備用;脫頸處死取小鼠肝臟和腿部肌肉迅速用錫紙包裹投入液氮冷凍,-80℃保存,進行血清睪酮、血清皮質醇、肌糖原、肝糖原、血清乳酸脫氫酶(LDH)、血尿素氮(BUN)和血清肌酸激酶(CK)測定。以上指標分別按照試劑盒進行操作。
各免疫組分別進行以下免疫功能測定。免疫組1:遲發性變態反應(DTH)、血清半數溶血值(HC50)、抗體形成細胞數(PFC)試驗;免疫組2:腹腔巨噬細胞吞噬功能試驗;免疫組3:碳廓清試驗;免疫組4:ConA誘導小鼠脾淋巴細胞轉化試驗、NK 細胞活性測定。
1.4 免疫功能結果判定
依據《保健食品檢驗與評價技術規範》[6] 增強免疫力功效的判定標準進行。在對免疫功能的評價中,體液免疫、細胞免疫、單核-巨噬細胞吞噬功能和NK 細胞活性四個方面中有兩個方面結果陽性,即可判定該受試物具有增強免疫力的作用。而前三方面各包含兩個實驗,其中只要有一個實驗,或任何一個實驗的兩個劑量組結果為陽性,就判定該方面的實驗結果為陽性。對於NK 細胞活性實驗,只要有一個劑量組為陽性,就判定NK細胞活性實驗結果為陽性。
1.5 統計分析
採用SPSS15.0 軟件進行統計分析,明日葉查爾酮不同劑量組分別與過度訓練組和陽性對照組比較,P<0.05具有統計學意義。
2 結果與分析
2.1 實驗小鼠一般表現
在整個實驗過程中,陽性對照組小鼠體毛有光澤,活潑。過度訓練組小鼠及明日葉查爾酮各劑量組小鼠在第2 周以後毛髮稀疏且蓬亂無光澤,精神委靡,嗜睡。第4 周時,補充明日葉查爾酮中、高劑量組小鼠精神狀態恢復,體毛比較潔淨,較為活潑。整個實驗過程中各組小鼠沒有出現死亡情況。
2.2 血清睪酮及血清皮質酮變化
表1 顯示,與過度訓練組比較,查爾酮中、高劑量組小鼠血清睪酮顯著升高(P<0.05),血清皮質酮顯著下降(P<0.05);與陽性對照組比較,查爾酮低劑量組小鼠血清睪酮顯著降低(P<0.05),血清皮質酮顯著升高(P<0.05)。
表1 小鼠血清睪酮及血清皮質酮水平
Table 1 Level of testosterone and serum corticosterone inmice |
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組別 | 動物數量 | 血清睪酮T(nmol/L) | 血清皮質酮C(nmol/L) |
過度訓練組 | 40 | 2.69±1.79 | 679.67±243.52 |
陽性對照組 | 40 | 4.33±1.21 | 357.68±175.35 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 40 | 2.99±1.98△ | 520.35±198.87△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 40 | 4.48±1.99* | 347.54±179.46* |
明日葉查爾酮高劑量組 | 40 | 4.71±2.40* | 361.09±181.49* |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05; △ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.3 明日葉查爾酮對抗疲勞效果的影響
2.3.1 明日葉查爾酮對肝糖原和肌糖原的影響
由表2 可知,與過度訓練組比較,查爾酮中、高劑量組小鼠的肝糖原和肌糖原含量都有顯著升高(P<0.05);與陽性對照組比較,查爾酮低劑量組肌、肝糖原含量顯著下降(P<0.05)。
表2 明日葉查爾酮對小鼠肝糖原和肌糖原含量的影響
Table 2 Effect of Ashitaba chalcone on the contents of liver glycogen and muscle glycogen of mice |
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組別 | 動物數量 | 肝糖原含量(mg/g) | 肌糖原含量(mg/g) |
過度訓練組 | 40 | 10.54±2.11 | 1.01±0.02 |
陽性對照組 | 40 | 13.52±2.72 | 1.52±0.07 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 40 | 11.11±1.24△ | 1.12±0.11△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 40 | 13.08±1.09* | 1.43±0.16* |
明日葉查爾酮高劑量組 | 40 | 14.11±1.21* | 1.58±0.05* |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05; △ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.3.2 明日葉查爾酮對血清尿素氮(BUN)、乳酸脫氫酶(LDH)、肌酸激酶(CK)的影響
由表3 可知,與過度訓練組比較,查爾酮中、低劑量組小鼠的血清BUN、LDH、CK 含量顯著降低(P<0.05);與陽性對照組比較,查爾酮低劑量組LDH、CK 含量顯著升高(P<0.05),BUN 含量有極顯著升高(P<0.01)。
表 3 明日葉查爾酮對小鼠血清尿素氮、乳酸脫氫酶和肌酸激酶的影響
Table 3 Effect of Ashitaba chalcone on the concentration of urea nitrogen and activity of lactic dehydrogenase in the blood serurn and liver homogenate mice |
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組別 | 動物數量 | 血清尿素氮BUN(mmol/L) | 血清乳酸脫氫酶LDH(U/L) | 血清肌酸激酶CK(mmol/L)
|
過度訓練組 | 40 | 16.89±4.79 | 4543.19±517.65 | 496.38±154.04 |
陽性對照組 | 40 | 11.11±3.42 | 4197.65±493.47 | 327.65±110.42 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 40 | 15.52±2.48△△ | 4496.36±458.46△ | 468.79±109.76△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 40 | 12.11±2.04* | 4136.41±397.68* | 361.12±111.23* |
明日葉查爾酮高劑量組 | 40 | 11..44±0.98* | 4009.48±122.76 | 327.19±111.82* |
注:# 與過度訓練組比較P<0.05;△ 與陽性對照組比較P<0.05,△△與陽性對照組比較P<0.01。 |
2.3 明日葉查爾酮對小鼠體液免疫的影響
2.3.1 明日葉查爾酮對小鼠抗體生成細胞數的影響
由表4 可知,與過度訓練組比較,查爾酮中、高劑量組小鼠抗體生成細胞數顯著升高(P<0.05,P<0.01);而與陽性對照組比較,查爾酮低劑量組小鼠抗體生成細胞顯著降低(P<0.05),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠抗體生成細胞數實驗結果陽性。
表4 不同劑量明日葉查爾酮小鼠抗體生成細胞測定結果
Table 4 Antibody-producing cells measurement results of Hemolysin measurement of different doses of Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | 溶血空斑數
(1×10/106 脾細胞) |
過度訓練組 | 10 | 142.00±41.20 |
陽性對照組 | 10 | 182.00±40.12 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 156.00±38.21△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 165.00±38.47* |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 189.00±350.50** |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05;** 與過度訓練組比較P<0.01;△ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.3.2 明日葉查爾酮對小鼠血清溶血素的影響
由表5 可知,與過度訓練組比較,查爾酮高劑量組小鼠抗體積數顯著升高(P<0.05);而與陽性對照組比較,查爾酮低、中劑量組小鼠抗體積數顯著降低(P<0.05),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠血清溶血素實驗結果為陰性。
表5 不同劑量明日葉查爾酮小鼠溶血素測定結果
Table 5 Hemolysin measurement results of different doses of Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | 抗體積數 |
過度訓練組 | 10 | 74.43±11.32 |
陽性對照組 | 10 | 89.91±31.24 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 73.65±29.54△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 79.51±26.41△ |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 88.56±54.16* |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05;** 與過度訓練組比較P<0.01;△ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.4 明日葉對小鼠細胞免疫的影響
2.4.1 明日葉對ConA 誘導的小鼠脾淋巴細胞轉化能力的影響
由表6 可知,與過度訓練組比較,查爾酮低、中、高劑量組小鼠淋巴細胞轉化能力顯著升高(P<0.05,P<0.01),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠脾淋巴細胞轉化能力實驗結果陽性。
表6 不同劑量明日葉查爾酮小鼠脾淋巴細胞轉化實驗結果
Table 6 Mouse spleen lymphocyte transformation test result of different doses of in mouse Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | 淋巴細胞增殖能力 (OD 值) |
過度訓練組 | 10 | 0.08±0.02 |
陽性對照組 | 10 | 0.15±0.05 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 0.12±0.02* |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 0.13±0.04* |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 0.16±0.07** |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05;** 與過度訓練組比較P<0.01。 |
2.4.2 明日葉對小鼠遲髮型變態反應的影響
由表7 可知,與過度訓練組相比,查爾酮各劑量組左右耳重量差值沒有顯著變化;與陽性對照組相比,查爾酮低、中、高劑量組相應指標顯著升高(P<0.05),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠遲髮型變態反應實驗結果陰性。
表7 不同劑量明日葉查爾酮小鼠遲髮型變態反應測定結果
Table 7 Mouse delayed type hypersensitivity test results of different doses of Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | 左右耳重量差值(mg) |
過度訓練組 | 10 | 8.36±1.44 |
陽性對照組 | 10 | 6.24±1.24 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 8.41±1.08△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 8.22±1.65△ |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 8.31±2.08△ |
注:△ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.5 明日葉對小鼠NK 細胞的影響
由表8 可知,與過度訓練組比較,查爾酮中、高劑量組的NK 細胞活性顯著升高(P<0.05);與陽性對照組比較查爾酮低劑量組NK 細胞活性顯著降低(P<0.05),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠NK 細胞活性測定實驗結果陽性。
表8 不同劑量明日葉查爾酮小鼠NK 細胞活性測定結果
Table 8 NK cell activity assay results in mice of different doses of Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | NK 細胞活性(%) |
過度訓練組 | 10 | 25.25±4.64 |
陽性對照組 | 10 | 29.99±4.39 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 24.99±4.39△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 28.99±4.39* |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 29.14±6.98* |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05;△ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.6 明日葉對小鼠單核巨噬細胞吞噬功能的影響
2.6.1 明日葉對小鼠單核巨噬細胞碳廓清的影響
由表9 可知,與過度訓練組比較,查爾酮高劑量組小鼠吞噬指數顯著升高(P<0.05);與陽性對照組比較,查爾酮低、中劑量組吞噬指數顯著降低(P<0.05),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠巨噬細胞碳廓清測定實驗結果陰性。
表9 不同劑量明日葉查爾酮小鼠單核巨噬細胞碳廓清測定結果
Table 9 Mouse monocyte macrophage carbon clearance test results of different doses of Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | 吞噬指數 |
過度訓練組 | 10 | 5.25±1.45 |
陽性對照組 | 10 | 6.23±1.66 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 5.09±1.21△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 5.31±1.28△ |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 6.31±1.39* |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05;△ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
2.6.2 明日葉查爾酮對小鼠的腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的影響
由表10 可知,與過度訓練組比較,查爾酮高劑量組的腹腔巨噬細胞對雞紅細胞的吞噬率和吞噬指數都顯著升高(P<0.05);與陽性對照組比較,查爾酮低、中劑量組相應指標顯著降低(P<0.05),根據免疫功能判定標準,明日葉查爾酮的小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力的實驗結果陰性。
表10 小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞測定結果
Table 10 Mouse peritoneal macrophage phagocytosis results of different doses of Ashitaba chalcone |
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組別 | 動物數量 | 吞噬率(%) | 吞噬指數 |
過度訓練組 | 10 | 17.25±5.45 | 0.22±0.12 |
陽性對照組 | 10 | 24.43±4.98 | 0.45±0.11 |
明日葉查爾酮低劑量組 | 10 | 18.33±3.87△ | 0.21±0.12△ |
明日葉查爾酮中劑量組 | 10 | 19.19±4.62△ | 0.23±0.11△ |
明日葉查爾酮高劑量組 | 10 | 10 25.31±7.36* | 0.44±0.09* |
注:* 與過度訓練組比較P<0.05;△ 與陽性對照組比較P<0.05。 |
3 討論
運動性疲勞是運動員經常遇到的一個問題。伴隨著運動性疲勞的發生,將出現一系列影響運動員身體健康的問題,甚至導致運動能力的急劇下降。其中,免疫力下降問題尤為突出。例如,運動員經常受到上呼吸道感染、單核細胞增多症的困擾[7]。這些疾病都與機體免疫力低下有直接關係[8,9]。
因此,運動性疲勞與機體免疫力下降常常相伴而生,成為運動醫學界的難題。西藥副作用大,又面臨運動員興奮劑檢測的問題。因此,科學家試圖從藥食兩用的植物性食物中尋找能延緩運動員疲勞產生,預防和改善運動員免疫功能的功能性食品。
明日葉是傳統的藥食兩用植物[10],早在李時珍的《本草綱目》中就有記載。為了充分挖掘其功效,本研究通過建立過度訓練的動物模型全面分析了明日葉中主要功效物質查爾酮對機體疲勞及免疫功能的影響。
參考相關文獻[5]並根據預實驗情況,建立了本實驗的小鼠過度訓練模型。通過測定血清睪酮、血清皮質酮含量可以判斷過度訓練模型建立是否成功[11,12]。經測定,與空白對照組比較,過度訓練模型小鼠的血清皮質酮顯著增高,血清睪酮顯著降低,而小鼠在過度訓練後出現明顯精神萎靡、睡眠障礙、食慾不振等症狀。一系列指標都表明,本研究建立的過度訓練動物模型是成功的。為了更加客觀、準確的反映明日葉查爾酮抗疲勞、增加免疫力的能力,在本實驗中以藥效明確的抗疲勞、增加免疫力的藥物作為陽性對照。
肌酸激酶(CK)是骨骼肌中重要的代謝酶。正常情況下肌細胞膜結構完整,CK 不會透過細胞膜[13,14]。當身體狀況改變,比如運動時,就有可能使CK 通過肌細胞膜進入血液,導致血液中的CK 升高。尿素氮(BUN)是蛋白質和氨基酸等含氮物質的代謝產物[15,16 ]。運動訓練使機體內的蛋白質代謝水平處於高位,BUN 明顯增加。
因此,BUN 常被作為反映運動量、身體機能和機體對訓練負荷承受能力的指標。乳酸脫氫酶(LDH)在催化糖代謝的丙酮酸和乳酸間的相互轉變中起重要作用。劇烈運動後,血液及組織中乳酸的大量產生使人體感到疲勞。
通過測定LDH 含量可以評定乳酸生成量,從而反映機體對運動負荷的適應程度[17]。本實驗結果中,與空白對照組比較,過度訓練組小鼠血清CK、BUN、LDH 水平顯著升高,說明過度訓練對機體產生了極大影響,而補充一定劑量明日葉查爾酮後,相應指標均顯著降低,與陽性藥物對照組比較沒有顯著差異。研究結果表明,中、高劑量組明日葉查爾酮能夠起到抗疲勞的作用。糖原是肌肉活動中能量的主要來源,大強度運動使糖原耗竭,肌糖原消耗的同時,為了維持血糖水平,肝糖原儲備量隨之減少[18-20]。因此糖原含量能夠說明疲勞發生的快慢或程度[21,22]。從實驗結果可知,過度訓練組和查爾酮低劑量組的肌糖原和肝糖原含量顯著低於空白對照組,而查爾酮中、高劑量組與陽性對照組比較沒有顯著差異。研究結果表明,中、高劑量組明日葉查爾酮可以通過增加糖原儲備給機體提供更多能量,以達到抗疲勞目的,對延緩疲勞的產生具有良好的保健作用。
NK 細胞是一類大顆粒淋巴細胞,它具有直接殺傷靶細胞的作用。現已證實,NK 細胞不僅在機體的細胞免疫中佔重要作用,而且在運動過程中免疫系統的機能變化中佔重要位置。在長時間耐力性訓練後NK 細胞濃度持續下降[23]。
本實驗結果表明,中、高劑量查爾酮可以顯著增加過度訓練小鼠NK 細胞水平,提高機體免疫力。
抗體生成細胞檢測實驗的原理為,綿羊紅細胞免疫的小鼠脾細胞懸液與一定量綿羊紅細胞混合,經補體參與,使分泌抗體的脾細胞周圍的綿羊紅細胞溶解,形成肉眼可見的空斑[24]。溶血空斑數可反映抗體生成細胞數。抗體生成細胞數通常作為反映體液免疫情況的指標。當機體進行大強度運動產生運動疲勞時,通常抗體生成細胞數減少,造成免疫力降低。本實驗結果表明,中、高劑量查爾酮可以顯著提高過度訓練小鼠抗體生成細胞數,說明查爾酮可以通過增加抗體生成細胞數增強機體免疫。脾臟是體內的最大外周免疫器官,是T、B 淋巴細胞定居及接受抗原刺激進而產生免疫應答的重要場所,在機體的免疫防禦、免疫調節、免疫修復及免疫監視等多環節都發揮著重要的作用[25]。本實驗結果表明,中、高劑量查爾酮能夠顯著促進過度訓練小鼠脾淋巴細胞成熟、轉化,進而提高機體細胞免疫能力。在免疫功能的評價中,根據已有的規範標準[6],本實驗進行了體液免疫、細胞免疫、單核-巨噬細胞功能和NK 細胞活性四個方面的評定。其中,體液免疫、細胞免疫、NK 細胞活性的實驗結果均為陽性。因此,可以判定明日葉查爾酮確實能夠改善過度訓練小鼠的免疫功能。
4 結論
明日葉查爾酮能夠通過增加機體糖原儲備,抵抗和延緩疲勞產生,通過增加NK 細胞活性、提高抗體形成細胞數量和脾臟淋巴細胞轉化能力來增強機體的免疫能力,而且其功效與已有的有明確藥效的改善機體免疫力和抗疲勞的藥物相類似。因此,本研究為充分利用明日葉,將明日葉查爾酮開發為增強機體免疫力、抗疲勞的運動營養補充劑提供了參考。
參考文獻
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