研究地點:南京大學生命科學學院、浙江林學院浙江省現代森林培育技術重點實驗室
1植物名稱:明日葉(AngelicakeiskeiKoidz.)。
2材料類別:葉,葉柄,帶芽莖段。
3培養條件:以MS為基本培養基。
(1)芽誘導培養基:MS+6-BA2mg•L-1(單位下同)+NAA0.5;
(2)芽增殖培養基:MS+6-BA1;(3)生根培養基:MS+NAA1。以上培養基均含3%蔗糖、1%瓊脂,pH6.8。培養溫度(22±2)℃,光強40µmol•m-2•s-1左右,光照時間16h•d-1。
4生長與分化情況
4.1取材與消毒取明日葉長約1cm的帶芽莖段、葉片和葉柄,用洗衣粉漂洗5min,流水沖洗10min,然後在超淨工作台上用70%酒精浸泡10s,再用0.1%HgCl2滅菌10min,並不斷攪拌,最後用無菌水沖洗5~8次,消毒也可省去酒精浸泡的步驟。用無菌濾紙吸乾材料上的水分,切割葉片為0.5cm×0.5cm的小片,葉柄長0.5cm,將3種材料接種在培養基(1)上。
4.2愈傷組織及不定芽的誘導明日葉葉片和葉柄在培養基(1)上,經過3個多月的培養,未長出愈傷組織。最適合的外植體為帶芽莖段,在培養基(1)上,30d左右便形成白色愈傷組織,並長出綠色芽點。繼續培養後可誘導出叢生狀芽。
4.3增殖培養將叢生芽分離,再接到培養基(2)中,20d左右芽增殖,增殖倍數約為3。通過反復切割,在較短時間里可得到大量叢生芽。
4.4生根與移栽將叢生芽切割後接到生根培養基(3)中,約40d後,開始出現根。在生根培養過程中發現,全天24h暗培養有利於生根,暗培養約20d即可生根。長出根後繼續培養20d,根可達1~1.5cm,生根率約80%,苗高4~5cm。此時,將培養瓶放到全天自然光,溫度約25℃的通風房間里煉苗20d,然後打開瓶蓋,用鑷子將試管苗從培養瓶中取出,洗掉根部培養基,移栽入營養土中,早晚各噴水1次,10d後,移栽苗成活率80%以上。
5意義與進展
明日葉,又名八丈芹、靈草、海峰人參、長壽菜,屬傘形科當歸屬2年生或多年生草本植物,是一種藥食兼用的蔬菜。本文中的明日葉原產於日本火山灰地質的八丈島,適應高冷環境,在中、高海拔可全年栽種,低海拔或平原地區適秋種。20多年前從日本引進,我國台灣亦廣泛栽培。
據日本食品分析中心研究,此種植物含有高濃度的天然有機鍺和一般植物性食物很少有的維生素B12,以及豐富的葉綠素,同時還含有人體所需要的20多種礦質元素和特殊物質。具有增強免疫力、補血、抗菌、促進成長、增進食慾和防癌等功效。
明日葉的果實是雙懸果,其種子發芽率較低,不易栽培。組織培養技術可以大大提高其繁殖系數,有一定的潛在性應用前景。
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